Dom Orione queria também as irmãs de clausura. Como este estilo de vida estava na intuição que o Espírito suscitou à sua ação, este grupo nasceu a partir de uma decisão capitular do Instituto em 1987, visto que muitas Irmãs também desejavam realizar-se neste estilo de vida. Na Itália, teve início mais uma comunidade específica no Instituto, as Irmãs Contemplativas de Jesus Crucificado, aos 14 de setembro de 1990, na festa da Exaltação da Santa Cruz. Elas também servem a Igreja na oração e no silêncio da clausura, oferecem a própria vida escondida na comunhão com Cristo, procurando identificar-se com a missão de Jesus Crucificado nos sofredores de hoje e pela salvação da humanidade.